期刊简介
本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果，研究进展有及研究方向，适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员，生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。
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首页>医学分子生物学杂志
- 杂志名称：医学分子生物学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1672-8009
- 国内刊号：42-1720/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录：剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
长链非编码RNA0610009 E02 Rik／Notch1腺病毒载体构建及其在原代肝细胞中的表达
秘红岭；杨娜；夏园；乔建林；李小莉；陈朝；褚培培；姚海娜；陈翀；徐开林；曾令宇
关键词：长链非编码RNA, 重组腺病毒, 肝细胞
摘要：目的：构建长链非编码RNA?0610009 E02 Rik （长链非编码RNA?0610009 E02 Rik，简称Rik）重组腺病毒载体，制备一定滴度含Rik基因的重组腺病毒，为后续研究Rik的生物学功能提供实验工具。方法①应用分子克隆技术以Rik的cDNA为模板， PCR扩增，酶切，将酶切后的目的基因连接到腺病毒穿梭质粒GV315上，产生0610009 E02 Rik腺病毒表达载体，连接好的产物转化感受态大肠埃希菌进行克隆，对阳性克隆进行酶切鉴定并测序；②重组腺病毒穿梭质粒和辅助包装质粒pBHG在人胚胎肾293细胞中包装、扩增、纯化并测定病毒滴度；③将构建好的腺病毒感染原代肝细胞， Real?time PCR检测原代肝细胞内Rik的相对表达水平。结果①成功构建Rik重组腺病毒穿梭载体；②重组病毒经扩增、纯化，终滴度测定约为2×1010 PFU／ml；③ Real?time PCR检测过表达组肝细胞内Rik的表达量约为对照组的2440＋0?36倍（P＜0?05），差异有统计学意义。结论构建含Rik基因的腺病毒载体，在小鼠原代肝细胞内成功实现了Rik基因的表达上调，为后续开展有关Rik生物学功能及分子机制研究奠定基础。
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