期刊简介
本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果，研究进展有及研究方向，适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员，生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。
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首页>医学分子生物学杂志
- 杂志名称：医学分子生物学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1672-8009
- 国内刊号：42-1720/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录：剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
MiRNA-24、 miRNA-34 a和miRNA-375抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1／BETA2的蛋白表达
张许；朱云霞；韩晓
关键词：miRNA-24, miRNA-34a, miRNA-375, NeuroD1, 3′非翻译区, 胰岛β细胞
摘要：目的：在小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中分析miRNA?24、 miRNA?34a和miRNA?375对Neurod1／BETA2的表达调控以及作用方式。方法设计并合成针对小鼠Neurod1基因3′非翻译区（3′untranslated re?gion，3′UTR）序列的引物，克隆于pMIR?REPORTTM荧光素酶报告基因载体中；用miRanda软件预测可能调控Neurod1表达的miRNAs，挑选在β细胞中有相关功能研究的miRNAs并委托公司合成pre?miRNAs；脂质体法转染至MIN6细胞中，荧光素酶报告基因技术分析这些miRNA对Neurod1的作用；定量RT?PCR分析Neurod1的mRNA水平； Western 印迹检测Neurod1的蛋白表达水平； GSIS检测干扰Neurod1后MIN6细胞的功能。结果成功制备小鼠Neurod1基因的3′UTR荧光素酶报告基因载体；选取了预测在Neurod1的3′UTR有互补结合位点的3个miRNAs （miRNA?24、 miR?34a和miR?375），并挑选一个没有互补结合位点的miRNA （miR?29a）作为阴性对照；在MIN6细胞中过表达pre?miRNA?24、 pre?miR?34a和pre?miR?375能够抑制Neurod1基因3′UTR荧光素酶报告基因的活性，而过表达阴性对照 miRNA?29a则不能抑制其活性；pre?miRNA?24、 pre?miR?34a和pre?miR?375还可以不同程度抑制Neurod1的蛋白表达；在MIN6细胞中干扰Neurod1蛋白表达能够降低细胞的GSIS功能。结论 miRNA?24、 miR?34a和miR?375能够抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1的蛋白表达。
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