期刊简介

               本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果,研究进展有及研究方向,适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员,生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。                

首页>医学分子生物学杂志
  • 杂志名称:医学分子生物学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:华中科技大学同济医学院
  • 国际刊号:1672-8009
  • 国内刊号:42-1720/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录:剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
医学分子生物学杂志2012年第01期

PML coiled-coil结构域与RAN结合蛋白9相互作用的验证

黎亮;刘北忠;钟梁;朱丹;王翀;高艳军;吴秀娟;初晨

关键词:白血病, 蛋白质相互作用, 酵母双杂交系统, 免疫共沉淀
摘要:目的 验证前髓细胞性白血病的卷曲螺旋结构域(PML-C)和RAN结合蛋白9(RANBP9)之间的相互作用.方法 构建分别表达诱饵蛋白PML-C和靶蛋白RANBP9的载体pGBKT7-PML-C和pACT2-RANBP9,然后转入酵母AH109,培养3~5 d后对其是否有胞内相互作用进行检测.将目的 片断PML-C和RANBP9再次构建于真核生物表达载体pCMV-HA和pCMV-myc里,然后共转染人胚肾293细胞里(HEK293),后对其是否有体外相互作用通过免疫共沉淀和免疫印迹进行分析.结果 在共转化了质粒pGBKT7-PML-C和pACT2-RANBP9的AH109酵母平板里观察到蓝色菌落生长.用抗HA多克隆抗体对共转染过重组质粒的HEK293细胞的蛋白提取物进行免疫共沉淀,再用抗myc单克隆抗体作为一抗进行免疫印迹,终检测出融合蛋白myc-RANBP9条带.结论 酵母双杂交实验验证了PML-C和RANBP9之间存在胞内相互作用,同时免疫共沉淀实验也从体外验证了它们之间的相互作用.