期刊简介
本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果，研究进展有及研究方向，适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员，生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。
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首页>医学分子生物学杂志
- 杂志名称：医学分子生物学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1672-8009
- 国内刊号：42-1720/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录：剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
重组泛素连接酶SH2-U-box/RING的构建与表达
茹懿；李瑗春；王秦豪；钟代星；李霞
关键词：泛素, 慢性粒细胞白血病, 重组质粒
摘要：目的 构建重组泛素连接酶SH2-U-box、SH2-RING,并克隆进入pFlag-CMV4真核表达载体,为研究靶向降解慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)患者瘤细胞中过度活化的BCR/ABL,抑制肿瘤细胞的生长提供基础.方法 设计引物,扩增接头分子Grb2的SH2结构域以及E3泛素连接酶CHIP的U-box、Cbl的RING结构域,通过重组PCR,将SH2分别与U-box、RING进行融合,融合片段双酶切之后插入真核表达载体pFlag-CMV4,经过酶切鉴定及测序后,转染HEK293T细胞,Western 印迹验证重组质粒的表达.结果 PCR结果提示SH2-U-box条带大小888 bp,SH2-RING大小为633 bp,重组质粒酶切鉴定和测序结果均正确,转染后可见融合蛋白的表达.结论 成功构建真核重组表达载体pFlag-CMV4-SH2-U-box和 pFlag-CMV4-SH2-RING,转染HEK293T细胞后能够正确表达,为后续研究奠定了基础.
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