期刊简介
本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果，研究进展有及研究方向，适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员，生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。
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首页>医学分子生物学杂志
- 杂志名称：医学分子生物学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1672-8009
- 国内刊号：42-1720/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录：剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
UHRF2结构域突变体的原核表达与纯化
白露；胡斌；杨艳；段昌柱
关键词：UHRF2, 结构域突变体, GST融合蛋白, ICBP90, 表观遗传学
摘要：目的 构建 UHRF2 各个以结构域为基础的突变体原核表达载体,在大肠埃希菌中表达并对融合蛋白进行纯化和鉴定.方法 以 pCMV-3xFlag-UHRF2 为模板,PCR 扩增 UHRF2 的各个结构域基因片段,各 PCR 产物经酶切后连接到 pGEX-4T-1 载体上;将重组载体转化大肠埃希菌 (BL21菌株),IPTG 诱导表达各 GST 融合蛋白,超声波破碎细菌,离心收获蛋白并经谷胱甘肽琼脂糖凝胶 4B(glutathione sepharose 4B) 亲合纯化;纯化的蛋白经 SDS-PAGE 电泳后用考马斯亮蓝染色或免疫印记实验鉴定各蛋白表达情况.结果 成功构建了 UHRF2 结构域突变体的原核表达载体,各突变体蛋白表达正确.结论 UHRF2 各结构域突变体的成功构建便于用 GST pull-down 实验研究 UHRF2 参与与其它蛋白相互作用的结构域,为了解UHRF2 功能打下了基础.
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