期刊简介

               本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果,研究进展有及研究方向,适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员,生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。                

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  • 杂志名称:医学分子生物学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:华中科技大学同济医学院
  • 国际刊号:1672-8009
  • 国内刊号:42-1720/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录:剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
医学分子生物学杂志2012年第05期

分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR的构建

王三虎;马云;秦凌雪;何彬彬;李斌元;苏泽红;何淑雅

关键词:FXR1P, IQCE, SEAP, 脆性X综合征
摘要:目的 构建分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase reporter gene,SEAP)报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,为鉴定FXR1P是否是通过与IQCE的3'UTR发生相互作用,进一步探索FXR1P的功能奠定基础.方法 首先设计目的基因片段IQCE3'UTR的PCR引物,然后通过RT-PCR扩增IQCE基因3'UTR基因片段,酶切扩增的片段和报告基因空载体,并将空载体去磷酸化,去磷酸化后的空载体与目的基因片段进行连接反应,将连接产物转化人大肠埃希菌JM109,后筛选阳性克隆,PCR鉴定插入序列的正反.结果 构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,经酶切鉴定、正反鉴定和测序分析可知重组载体构建成功.结论 成功构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,为进一步探索FXR1P的功能及其在脆性X综合征中的发病机理有着重要的意义.