期刊简介

               本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果,研究进展有及研究方向,适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员,生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。                

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  • 杂志名称:医学分子生物学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:华中科技大学同济医学院
  • 国际刊号:1672-8009
  • 国内刊号:42-1720/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录:剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
医学分子生物学杂志2012年第05期

Ad-XBP1S重组腺病毒对ATDC5细胞周期与凋亡的效应研究

刘艳娜;周菁华;张鹏;韩晓凤;郭风劲

关键词:X盒结合蛋白1, 重组腺病毒, ATDC5细胞, 细胞凋亡, 增殖
摘要:目的 构建重组人剪接型X盒结合蛋白1 (X-box binding protein 1 spliced,XBP1S)并探讨其对软骨祖细胞ATDC5周期和凋亡的影响.方法 应用pAdEasyTM腺病毒载体系统,构建得到XBP1S基因全长的重组穿梭质粒pAdTrack-XBP1S,通过电转法同腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,获得重组腺病毒pAd-XBP1S.随后在HEK-293细胞中包装并扩增重组腺病毒颗粒Ad-XBP1S.用直接PCR法鉴定重组腺病毒.体外感染软骨祖细胞ATDC5,观察绿色荧光蛋白(GFP)感染效率,并应用流式细胞仪(FCM)分别在加入毒胡萝卜素(tunicamycin,TM)和不加入TM的条件下,检测重组腺病毒Ad-XBP1S对ATDC5细胞周期和凋亡的影响.结果 酶切鉴定和PCR证实成功构建了重组腺病毒质粒pAd-XBP1S.FCM检测结果表明,在ERS条件下,Ad-XBP1S实验组ATDC5细胞G1(60.70%)期细胞比例低于TM (87.78%)、Ad-GFP对照组(85.24%) (P<0.05),Ad-XBP1S实验组ATDC5细胞S期(26.64%)高于TM(6.69%)、Ad-GFP对照组(7.35%)(P<0.05);TM刺激诱导ERS条件下,感染Ad-XBP1S腺病毒上清后,ATDC5细胞的凋亡率为7.81%,与TM (33.32%)、Ad-GFP对照组(25.95%)比较,差异具有显著性(P<0.05).结论 含XBP1S基因的重组腺病毒感染ATDC5细胞后,可加速ATDC5细胞周期的转化并抑制其凋亡.为后续研究XBP1S生物学功能奠定了基础.