期刊简介
本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果,研究进展有及研究方向,适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员,生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。
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首页>医学分子生物学杂志

- 杂志名称:医学分子生物学杂志
- 主管单位:中华人民共和国教育部
- 主办单位:华中科技大学同济医学院
- 国际刊号:1672-8009
- 国内刊号:42-1720/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录:剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
IRE1结构域分析及截短型载体的构建和表达
刘平;李祥柱;赵文君;刘艳娜;周菁华;郭风劲
关键词:内质网应激, 需肌醇酶, 结构域, 载体构建
摘要:目的 克隆IRE1基因,根据IRE1基因不同生物学功能的4个结构域构建截短型真核表达载体,并用生物信息学方法对其蛋白产物进行分析.方法 应用PCR重组技术,以pCMV-IRE1为模板扩增IRE1全长及4个截短型片段,利用DNA重组技术将片段定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,经酶切及测序鉴定后,免疫印迹检测各重组载体在细胞中的表达,并利用SWISS-MODEL在线软件预测其蛋白结构.结果 酶切鉴定及Western 印迹结果表明成功构建了IRE1全长及每一种截短型片段的真核表达载体:pcDNA3.1(-)-IRE1(pIRE1),pcDNA3.1(-)-IRE1-NLDP(pNLD),pcDNA3.1(-)-IRE1-KinaseP(pKinase),pcDNA3.1(-)-IRE1-R+L(pR+L),pcDNA3.1(-)-IRE1-RNase(pRNase).结论 IRE1及其截短型真核表达载体的成功构建和表达,为进一步研究IRE1各个结构域的生物学功能奠定了基础.
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