期刊简介

               本刊主要报道医学分子生物学领域的最新研究成果,研究进展有及研究方向,适合于广大从事医学分子生物学研究的科技工作者及临床医务人员,生物工程、生化、分子药理、分子病理、免疫学、遗传学等相关人员。                

首页>医学分子生物学杂志
  • 杂志名称:医学分子生物学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:华中科技大学同济医学院
  • 国际刊号:1672-8009
  • 国内刊号:42-1720/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:首届、第二届中国高校特色科技期刊奖期刊收录:剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
医学分子生物学杂志2008年第01期

70 mer长寡核苷酸探针芯片制备、标记方法及杂交条件的优化

庞靖祥;韩金祥;高雪芹;潘继红

关键词:寡核苷酸探针, 基因芯片, 条件优化
摘要:目的 优化长片段寡核苷酸芯片制备、探针标记及杂交条件.方法 通过直接标记方法优化芯片的点样浓度、点样后的固定方法.探索两种靶基因标记方法,并优化杂交液及各种杂交条件.结果 采用70 mer寡核苷酸探针,点样浓度在10 μmol/L时就可获得满意的荧光强度.探针点样后37 ℃水合,然后在3 600 mJ条件下进行紫外交联固定效果好.样品采用生物素间接标记较CY3直接标记信号强度强,成本相对低廉.优化出的杂交液成分:50 %甲酰胺、5×SSC、0.5 %SDS,杂交时间为8 h,杂交温度为65 ℃.结论 通过此试验优化了制备病原体长探针寡核苷酸芯片的制备方法,样品标记策略和杂交液及杂交温度,为下一步制备多种病原体的寡核苷酸芯片检测系统奠定了基础.